MET受体酪氨酸激酶（c-MET）是肿瘤研究领域备受关注的重要靶点之一。在肺癌、肝癌、胃癌等多种恶性肿瘤中，MET的异常激活特性往往与肿瘤发生、侵袭转移以及耐药密切相关。近年来，针对MET开发的小分子抑制剂、抗体以及ADC等治疗策略不断取得进展。
然而，目前大多数MET靶向药物主要作用于蛋白水平，对于部分MET扩增或过表达患者仍存在耐药及疗效受限等现象。因此，如何从基因表达调控层面实现MET下调，成为近年来肿瘤研究的关键突破口。
近日，中国药科大学研究团队在《Nature Communications》（IF=18.1）发表最新研究成果，首次系统解析了MET启动子区域G-四链体（G-quadruplex，G4）的高分辨率结构，揭示了LRPPRC–MET-G4相互作用调控MET表达的新机制，并创新性提出利用分子胶（Molecular Glue）稳定G4-蛋白复合物以实现MET表达抑制，为G4靶向抗癌药物研发提供了新思路。
赛索飞生物为本研究提供质粒合成服务，助力团队完成MET-G4转录调控与Nitidine药效的系列验证工作，为实验环节提供坚实支撑。
图1. LRPPRC–MET-G4调控机制Nitidine作用模式示意图。研究揭示Nitidine通过稳定LRPPRC–MET-G4复合物，下调MET表达，从而抑制肿瘤发生发展的全新机制。
视角前移：
从蛋白抑制到基因调控
目前，大多数MET抑制剂都是通过抑制MET蛋白激酶活性发挥作用，而研究团队另辟蹊径，将调控靶点向前推进至基因DNA层面，从转录源头探索全新干预方案。
研究人员发现，在MET启动子附近存在一段富含鸟嘌呤（G-rich）的DNA序列，可以形成稳定的G-四链体结构（MET-G4）。这一特殊DNA高级结构并非只是静态存在，而是参与了MET基因的转录调控。进一步实验发现，这一G4结构能够招募LRPPRC蛋白，从而促进MET基因表达；当这一调控过程受到干预时，MET表达水平则呈现明显下降趋势。
研究人员得出结论，相比直接抑制已经产生的MET蛋白，从源头调控MET基因表达，或许能够提供一种全新的治疗策略。
结构解析：
高分辨图谱奠定理论基础
为了深入理解MET-G4的结构特点，研究团队利用高分辨率NMR技术解析了MET-G4三维结构。
研究结果显示，MET-G4形成稳定的三层平行G-四链体结构，并具有独特的环区及末端构象，这些结构特征为蛋白识别提供了特异性结合位点。随后，研究人员结合AlphaFold预测、分子对接以及分子动力学模拟，进一步构建了LRPPRC与MET-G4相互作用模型，并确定了关键结合区域和多个重要氨基酸位点。
这些结构生物学研究不仅揭示了MET-G4发挥生物学功能的分子机制，也为后续G4靶向药物设计提供了重要的理论基础。
图2. MET-G4与LRPPRC相互作用结构解析。研究结合NMR结构解析、AlphaFold预测及分子动力学模拟，揭示了LRPPRC识别MET-G4的关键结合区域，为G4靶向药物设计提供了结构基础。
策略创新：
分子胶概念开辟治疗新思路
除了揭示新的调控机制外，该研究开创性地提出了一种不同于传统G4配体的全新策略。
研究团队从天然产物库中筛选发现，白屈菜红碱（Nitidine）能够稳定MET-G4结构，并进一步促进LRPPRC与MET-G4形成更加稳定的三元复合物。这一过程并非简单地阻断蛋白结合，而是通过形成LRPPRC–Nitidine–MET-G4三元复合体，改变LRPPRC功能，最终实现MET表达下调。
作者将这种作用机制定义为一种作用于G4-蛋白界面的分子胶（Molecular Glue）。传统分子胶主要用于稳定蛋白-蛋白相互作用，而本研究首次将这一概念拓展到蛋白-DNA复合物，为G4靶向药物研发提供了新的方向。
图3. 基于MET启动子报告系统的功能验证。研究利用野生型（MET-G4 WT）及突变型（MET-G4 MUT）报告质粒验证了MET-G4对转录活性的调控作用，并进一步证实Nitidine能够通过稳定MET-G4实现MET表达下调。
本次研究中，用于功能验证的报告质粒由赛索飞生物定制交付，为研究团队验证MET-G4的转录调控作用及Nitidine的抑制效果提供了重要实验工具，助力取得突破性成果。
体内外验证：
多维度证实抗肿瘤潜力
为了验证这一分子调控机制，研究团队开展了系统性的体内外实验。在肝癌、MET扩增肺癌细胞中，Nitidine能够显著降低MET mRNA及蛋白表达水平，同步抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞。进一步的小鼠异种移植瘤实验也印证了该分子的抗肿瘤效果，Nitidine能够有效减缓肿瘤生长，降低MET表达水平，且整体表现出较好的安全性。
通过以上实验，研究团队指出，现阶段Nitidine更适合作为机制探索的工具分子，分子自身的靶点选择性与成药属性仍存在较大的优化空间。但该系列实验充分证实，LRPPRC–MET-G4相互作用界面，具有开发新型抗癌药物靶点的巨大潜力。
图4. Nitidine在动物模型中表现出良好的抗肿瘤活性。体内实验显示，Nitidine能够显著抑制肿瘤生长，并降低MET表达水平，进一步验证了LRPPRC–MET-G4调控轴作为潜在抗癌靶点的应用价值。
前沿展望：
新机制引领MET研究新航向
近年来，G-四链体（G-quadruplex，G4）凭借其在基因表达调控中的重要作用，已成为核酸药物研发和肿瘤治疗领域的热门研究方向。但各类G4核酸结构之间相似度较高，如何精准识别单一特定G4、实现高选择性干预，始终是G4靶向药物研发难以突破的核心难题。
本研究首次揭示了LRPPRC–MET-G4相互作用在MET基因转录调控中的关键作用，并提出利用分子胶稳定G4-蛋白复合物的新策略，将G4靶向对象从单纯的核酸结构拓展到G4-蛋白相互作用界面。这一发现不仅完善了学界对MET异常表达背后分子机制的理解，也为新一代G4靶向抗肿瘤药物开辟了全新研发路径。
未来，依托结构生物学、核酸化学、AI辅助药物设计、精准医学等技术的持续迭代，围绕G4及其互作网络开展的相关研究，将持续推动肿瘤靶向治疗技术革新，也为众多以往难以开发药物的 “难成药靶点” 提供全新解决方案。