Sanger测序 - 赛索飞

Sanger测序

赛索飞拥有一批专业的技术人才，经过多年的技术积累，建立了标准的Sanger测序平台，也搭建了高通量测序及生物信息分析平台，并且对部分项目可做到上门取样快速交付的绿色通道。

赛索飞现有服务类型：已纯化DNA模板测序、未纯化PCR产物测序、质粒测序、菌液测序、复杂模板测序。

服务特色：

· 质量可靠：上下游实验均采用磁珠纯化，实验稳定，结果更好；连续有效读长保证800bp，长度可达1000bp；每次判定结果都参考质量评分（Quality Score）和连续读长（CRL）

· 交付快：当日取样，次日上午发送结果

· 通量高：拥有多台3730xl测序仪，可满足大批量测序要求

· 更有复杂结构的最佳测序方案与免费的通用载体提供

TA克隆

TA克隆方法（Original TA Cloning Kit）把PCR片段与T载体DNA连接起来的方法。通过PCR的方法扩增目的基因片段，往往由于缺失或其他原因无法获得准确的DNA序列。通常需要通过TA克隆的方法重组到T－载体中，再使用通用引物测出准确DNA序列。

由于在PCR过程中使用的DNA聚合酶不同往往分为2种情况：

· 使用Taq酶，Taq酶可以在扩增产物的3末端加上A，因此PCR产物回收纯化后可以和T载体直接连接

· 使用高保真的DNA聚合酶，如pfu酶，由于其不能在扩增产物的3末端加上A，得到的DNA序列为钝端

因此，需要在回收纯化后进行加A的过程，通常是以PCR回收产物为模板加上一定量的普通Taq酶和反应液，加入dATP（或dNTP)，72°C 10分钟,然后将加A产物直接用于TA连接。

菌种鉴定

赛索飞为您提供细菌、真菌等微生物的菌种鉴定服务，通过扩增细菌16S rDNA、真菌18S rDNA或ITS片段进而测序，并与NCBI数据库比对以达到分类鉴定的目的。

通过采用测序方法对各种细菌的16S rDNA进行广泛的研究获得了大量的16S rDNA序列信息，并汇总到NCBI数据库中。将测序得到的16S rDNA序列在NCBI上进行Blast比对即可获知与该序列同源性较高的已知序列，为确定菌种的分类学地位提供依据。

测序样品要求

样品类型	样品标准
质粒	请将质粒溶解于双蒸水中；浓度> 50 ng/μL，体积大于5µL/反应。大片段质粒（> 10kb）请在测序单上注明长度
已纯化PCR产物	请将回收后的产物溶于双蒸水中；浓度>10ng/μL，体积大于5µL/反应。电泳检测条带单一，且大小正确
未纯化PCR产物	• 条带不单一的PCR产物：浓度需> 10ng/µL，体积> 20µL • 条带单一的PCR产物：浓度需> 10ng/µL，体积> 5µL/个反应若片段大小< 200bp，建议克隆后测序；送样前取2μL 样品做电泳检测，确保目的条带清晰可见
菌液/平板菌落	菌液：请将50μL (不少于30µL)过夜培养的新鲜菌液或甘油菌，装入1.5 mL 离心管中，清晰标注样品编号并封口保存，防止交叉污染或泄漏。平板菌落：请将待测的菌落圈选标注并编号，并使用缓冲垫以防运输过程中出现破损。请在测序单上注明载体的抗性，我们提供Amp，Kana两种抗生素。若为低拷贝质粒或需特殊培养条件，建议直接提供质粒（按照质粒要求）
噬菌体	噬菌体上清液：按菌液要求噬菌斑：按平板菌落要求（部分实验室暂不提供噬菌体测序服务，请与您的销售联系确认）

测序服务报价

如何订购测序服务？

填写测序订购单，将您的需求发送至 seq@genecfps.com。

您也可以致电 0510-85220969转802 联系我们。

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